高速逆流色譜儀在行業(yè)應(yīng)用中有什么技術(shù)特點(diǎn)?
發(fā)布時(shí)間:2019-07-10 點(diǎn)擊次數(shù):1094次
高速逆流色譜儀是一種新的液相色譜技術(shù),利用液液兩相的逆流分配,在沒(méi)有固體填料的情況下,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜的化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,替代了傳統(tǒng)的制備型液相色譜填充柱,和另一液體溶劑做流動(dòng)相在一個(gè)高性能的離心系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行操作。不需使用固態(tài)固定相,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中。
高速逆流色譜儀的原理:
高速逆流色譜儀是一種新的液相色譜技術(shù),利用液液兩相的逆流分配,在沒(méi)有固體填料的情況下,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜的化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,替代了傳統(tǒng)的制備型液相色譜填充柱,和另一液體溶劑做流動(dòng)相在一個(gè)高性能的離心系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行操作。不需使用固態(tài)固定相,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中。傳統(tǒng)固態(tài)填充柱的分離量一般為2%-7%的固定相重量中,嚴(yán)重限制了它的分離能力,而在HPCPC系統(tǒng)中該列包含50%-80%于固定相中,分離能力大大提高。
1、操作簡(jiǎn)便,容易掌握:儀器操作簡(jiǎn)單,對(duì)樣品的預(yù)處理要求低,一般的粗提物即可進(jìn)行的制備分離或分析。
2、重現(xiàn)性好:如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用,酸堿性也不強(qiáng),即使多次進(jìn)樣,其分離過(guò)程都保持很穩(wěn)定,而且重現(xiàn)性相當(dāng)好。
3、分離效率高,分離量較大:由于其與一般的色譜分離方式不同,能實(shí)現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫,亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣,使其特別適用于制備性分離,產(chǎn)品純度高,制備量大。
4、回收率高:不需要固相載體,消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失,理論上樣品的回收率可達(dá)。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件,一般都有很高的回收率。
5、應(yīng)用范圍廣,適應(yīng)性好:由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無(wú)限多的,因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離,在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體,因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來(lái)的吸附損失,特別適用于分離極性物質(zhì)。
6、分配系數(shù):溶劑系統(tǒng)的選擇是同時(shí)選擇色譜分離過(guò)程的兩相,是對(duì)樣品成功分離的關(guān)鍵所在,而樣品中各組分的分配系數(shù)決定著這種溶劑系統(tǒng)是否合適,因此分配系數(shù)的測(cè)定是選擇溶劑系統(tǒng)的重要環(huán)節(jié)。目前,分配系數(shù)的測(cè)定多采用薄層色譜法、毛細(xì)管電泳法、HPLC法、生物活性分配比率法及分析型HSCCC法。